Рак молочной железы (РМЖ) – самое распространенное из всех онкозаболеваний у женщин. По статистике, одна из девяти женщин заболевает раком молочной железы в течение жизни. Около 10% всех случаев РМЖ — это наследственная форма рака, обусловленная наследуемыми мутациями (необратимыми изменениями) в генах.
На сегодняшний день известен ряд генов, наследуемые мутации в которых приводят к возникновению семейных форм РМЖ и рака яичников. Наиболее изученными среди них являются гены BRCA1 и BRCA2. В организме человека белки, кодируемые этими генами: восстанавливают целостность поврежденных молекул ДНК, нормализуют баланс эстрогенов, тормозят деление пораженных клеток, препятствуют метастазированию. В результате мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 происходит повреждение клетки, вследствие чего активизируются процессы бесконтрольного деления, что и приводит к возникновению раковой опухоли.
Наличие мутаций в этих генах не означает, что обязательно разовьется рак молочной железы, но этот риск в течение жизни по некоторым данным приближается к 90% (!).
Ген CHEK2 кодирует протеинкиназу, активирующуюся в ответ на повреждение молекулы ДНК. Данный опухолевый супрессор контролирует вход клетки в митоз, репарацию ДНК. Наследственная мутация 1100delC приводит к синтезу неполноценного укороченного белка CHEK2. Мутация 1100delC в гене CHEK2 приводит к увеличению риска развития рака молочной железы в 2 – 10 раз. Мутация CHEK2 1100delC также ассоциирована с повышенным риском опухолей других локализаций (яичника, простаты, толстой кишки, желудка) и может встречаться в «раковых семьях» с отсутствием генетических дефектов генов BRCA1 и BRCA2.
Выявление мутаций в генах BRCA1, BRCA2, CHEK2 крайне важно и для тех пациенток, у которых диагноз РМЖ уже установлен. Зная факт наличия мутации, можно выбрать оптимальное лечение уже в первой линии химиотерапии. Этот анализ позволяет назначить эффективный противоопухолевый препарат: у носителей мутаций чувствительность к различным противоопухолевым препаратам отличается от таковой у лиц с отсутствием мутаций.
Наборы реактивов для выявления мутаций в генах BRCA1, BRCA2 и CHEK2
Регистрационное удостоверение № ФСР 2012/13492.
Наборы реактивов Real-time-PCR-BRCA1-5382insC, Real-time-PCR-BRCA1-T300G, Real-time-PCR-BRCA1-185delAG, Real-time-PCR-BRCA1-4153delA, Real-time-PCR-BRCA2-6174delT, Real-time-PCR-CHEK2-1100delC предназначены для выявления мутаций, связанных с наследственными формами рака молочной железы и яичников.
Наборы предназначены для клинической диагностики in vitro.
Характеристики наборов
Наборы содержат достаточное количество реагентов для проведения 50 реакций. Наборы оптимизированы для использования с амплификатором для проведения ПЦР в режиме реального времени “CFX96” (Bio-Rad, США). Использование других приборов возможно, но может потребовать изменения параметров ПЦР и повлиять на чувствительность метода.
Материал для исследования
В качестве материала для анализа используется геномная ДНК человека. Рекомендуемое количество ДНК для проведения одной реакции составляет 10-100 нг. При выделении ДНК рекомендуем использовать набор для выделения ДНК из цельной крови («Blood DNA Kit», Кат.№ 31601, 31602). При использовании других технологий выделения ДНК рекомендуем работать с количествами ДНК, по крайней мере, в 4 раза превышающими минимально возможные.
Минимальное количество ДНК, необходимое для реакции, – 2 нг. Максимальное количество ДНК, которое может быть использовано для 1 реакции, – 1000 нг.
Состав набора
Набор содержит реактивы достаточные для проведения 50 реакций с образцами ДНК и контролями. Набор состоит из пробирок с реагентами с цветными крышками и инструкции по применению.
Условия хранения
Хранить в темноте при -18С в течение 12 месяцев.
Принцип действия наборов реактивов
Образец является отрицательным (без мутации), если при использовании смеси праймеров для детекции ДНК гена дикого типа появляется кривая амплификации, которая пересекает порог флуоресценции не позднее 35 цикла, а кривая ампли-фикации при использовании смеси праймеров для детекции ДНК гена с мутацией отсутствует или появляется не ранее чем через 6 циклов после кривой амплификации ДНК гена дикого типа.
Образец является положительным (содержащим мутацию), если при использовании смесей праймеров для детекции ДНК гена дикого типа и ДНК гена с мутацией появляются кривые амплификации, пересекающие порог флуоресценции с разницей не более 2 циклов (в идеальном случае одна кривая должна накладываться на другую).
