Микросателлиты или короткие тандемные повторы – это некодирующие последовательности ДНК длиной от одной до шести пар нуклеотидов, повторяющиеся до нескольких десятков раз.
Микросателлитная нестабильность (MSI) – это состояние генетической изменчивости, которое возникает в результате нарушений в системе репарации ошибочно спаренных нуклеотидов ДНК (DNA mismatch repair, MMR). Система MMR играет важную роль в поддержании точности репликации ДНК и стабильности генома. В клетках с нарушениями в системе MMR происходит накопление мутаций по всему геному, в том числе изменение длины микросателлитов. Накопление генетических аберраций может приводить к злокачественной трансформации клеток.
MSI чаще всего встречается при синдроме Линча, колоректальном раке, злокачественных новообразованиях эндометрия и желудочно-кишечного тракта, также при раке молочной железы, простаты, опухолях мочевого пузыря, щитовидной железы и других органов.
Клетки опухоли с нарушенной системой MMR формируют изменённые белки, специфичные для опухоли и отсутствующие в нормальных тканях, которые называют «неоантигены». В некоторых случаях иммунная система может распознавать неоантигены как чужеродные белки, в результате чего развивается Т-клеточный иммунный ответ против опухоли. Однако опухолевые клетки могут использовать метаболический путь с участием PD-1 рецептора для ингибирования активного Т-клеточного ответа.
В 2017 году был зарегистрирован препарат пембролизумаб (торговое название «Китруда» ®), который представляет собой высоко аффинное антитело к PD-1 рецептору. Пембролизумаб блокирует связывание рецептора PD-1 с его лигандами, в результате реактивирует специфичные цитотоксические Т-лимфоциты в микроокружении опухоли, что приводит к усилению противоопухолевого иммунитета.
Препарат «Китруда» ® показан для лечения пациентов с распространёнными злокачественными новообразованиями с высоким уровнем микросателлитной нестабильности (MSI-H).
Диагностика дефицита системы репарации ДНК
ПЦР диагностика MSI построена на основе анализа длин специфических последовательностей микросателлитов. Объектом исследования являются пять микросателлитных маркеров (BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24 и NR-27).
Исследуемые маркеры представляют собой области однонуклеотидных повторов геномной ДНК, обычно встречающиеся в геноме человека в гомозиготном состоянии. Однако нарушение системы MMR в клетках опухоли приводит к изменению числа нуклеотидных повторов. Заключение о высоком уровне MSI (MSI-H) делается при наличии более одного максимума сигнала флуоресценции для каждого из локусов.
Показания к молекулярно-генетическому анализу:
 |
рекомендован пациентам с колоректальным раком для определения прогноза и тактики лечения; |
|
рекомендован пациентам с распространёнными злокачественными новообразованиями вне зависимости от локализации для определения показаний к проведению иммунотерапии; |
|
рекомендован пациентам со злокачественным новообразованием (рак тела матки, рак яичников, рак желудка и др.) при подозрении на синдром Линча. |
Материал для исследования:
 |
блок опухолевой ткани, фиксированной формалином и заключенной в парафин (FFPE-блок), |
|
венозная кровь. |