Набор для быстрого лигирования позволяет проводить клонирование ДНК по «липким» и тупым концам на столе за полчаса. Набор позволяет провести 200 реакций лигирования для создания рекомбинантных плазмид, библиотек и иных приложений. Перед электротрансформацией бактерий необходимо провести очистку лигазной смеси.
Фермент выделен из штамма E.coli, несущего рекомбинантную плазмиду, кодирующую ДНК-лигазу фага T4.
Состав набора:
- • 1 пробирка (200 мкл) — ДНК-лигаза фага T4
- • 1 пробирка (1×1000 мкл) 10x буфера лигирования
- • 1 пробирка (1×1600 мкл) вода
Фермент ДНК-лигаза фага T4 и буфер лигирования рекомендуется хранить при -20°C. Перед первым использованием рекомендуется расфасовать буфер лигирования на малые аликвоты (по 5-10 мкл) чтобы исключить многократное количество циклов размораживания-замораживания.
За одну единицу активности Т4 ДНК лигазы принимали количество фермента, необходимое для 50% сшивки HindIII-фрагментов ДНК фага лямбда за 30 мин при 16°С в 20 мкл реакционной смеси при концентрации ДНК 300 мкг/мл.
| Кат № | Наименование набора реагентов | Объем, мл |
|---|---|---|
| ODC-01 | ДНК-лигаза фага T4 с 2x буфером с PEG | 2 |
| ODC-02 | ДНК-лигаза фага T4 с 10x буфером | 1 |