Злокачественные опухоли связаны с высокой заболеваемостью и смертностью во всем мире. В последние годы появился новый эффективный принцип лечения онкологических заболеваний, применимый в основном к опухолям с нарушениями системы репарации, а следовательно и с микросателлитной нестабильностью — распознавание неоантигенов иммунной системой, при её соответствующей стимуляции лекарственными препаратами нового поколения.
Регистрация в 2017 году препарата Пембролизумаб (Китруда) для лечения опухолей с дефицитом системы репарации неспаренных оснований (mismatch repair-deficient, dMMR,MSI) стала одним из самых знаковых событий в онкологии последних лет.
Впервые в истории препарат был зарегистрирован вне нозологии, а по типу молекулярного нарушения в опухоли – по дефициту системы репарации, который можно выявить, по микросателлитной нестабильности.
В инструкции к препарату Пембролизумаб (Китруда) указано, что препарат может быть использован для лечения пациентов с распространенными злокачественными новообразованиями с высоким уровнем микросателлитной нестабильности (MSI-H).
Микросателлитная нестабильность – индикатор нарушения системы репарации ДНК. Клетки опухоли с нарушенной системой репарации ДНК формируют измененные белки, которые иммунная система организма может опознавать как «чужие», такие белки называют «неоантигены».
Опухоли, связанные с микросателлитной нестабильностью / нарушениями системы репарации ДНК
MSI чаще выявляется при спорадических формах рака толстой кишки, несколько реже — при опухолях желудка, эндометрия, легкого и при ряде других локализаций. Опухоли с микросателлитной нестабильностью как правило хорошо отзываются на иммунотерапию.
Микросателлиты — это повторяющиеся последовательности ДНК (длиной от 1 до 6 пар оснований), также известные как простые короткие тандемные повторы.
Микросателлитная нестабильность (MSI) — это состояние генетической гипермутабельности (предрасположенности к мутации), которое возникает в результате нарушения репарации ДНК (dMMR – mismatch repair deficiency, нарушение системы репарации неспаренных оснований). Микросателлитная нестабильность является следствием ошибок репликации ДНК. Формирующаяся при репликации дочерняя цепь ДНК претерпевает мутацию при копировании повторяющихся последовательностей из-за «проскальзывания» ДНК-полимеразы. В результате такого «проскальзывания» формируется петля вставки (или удаления) повторяющегося элемент (Рис.1). В норме такая петля удаляется белками репарации. Однако при дефиците белков репарации петли не удаляются, вновь образованная молекула ДНК становится длиннее (или короче) материнской, что и выражается, в частности, в микросателлитной нестабильности. Если повторы находятся в кодирующих участках, то такие изменения могут приводить к нарушениям структуры генов и, как следствие, к нарушению структур и функций белков.
Диагностика дефицита системы репарации ДНК
ПЦР диагностика MSI построена на анализе длин специфических последовательностей микросателлитов (Рис.2). В 2004 г. Национальный раковый институт США принял стандартную панель из 5 последовательностей, включающую две мононуклеотидных последовательности (BAT-25, BAT-26) и три динулеотидных последовательности (D2S123, D5S346, D17S250), которые сравнивают в клетках опухоли и клетках здоровой ткани (как правило, лимфоциты крови).
Заключение о высоком уровне MSI (MSI-H) делается при наличии несоответствия двух и более маркеров между ДНК клеток крови и ДНК клеток опухоли.
Биологический материал человека:
 |
Блок опухолевой ткани, фиксированный формалином, заключенный в парафин |
|
Кровь с ЭДТА |
Срок выполнения – 14 рабочих дней